Gram negativ

De bakterier i Gram-negative er markert med en teknisk fargestoffer som kalles gramfarging . Gramnegative bakterier virker da rosa under mikroskopet . Den farveteknikk er basert på membranen og vegg karakteristikker av bakterien. Dette er imidlertid ikke en fylogenetisk rangfaktor  : faktisk er Gram + og Gram - gruppene ikke monofyletiske .

Prinsipp for farging

Etter å ha fiksert bakteriene på et lysbilde (to mulige metoder: fiksering med etanol ved 90 ° (5 minutter) eller ved å føre lysbildet gjennom flammen, kalt smøre ):

• Lysbildet er nedsenket i et første fargestoff: gentian violet (1 minutt). Gentian violet er et kraftig fargestoff ( giftig og kreftfremkallende ). Det vil krysse veggene og membranene til bakterier og bosette seg i cytoplasmaet . Dermed blir alle cellene lilla på dette stadiet .
• Lysbildet blir deretter behandlet med lugol ( jod ) i oppløsning som fungerer som en mordant (30 sekunder): det vil styrke gentianfioletten som finnes i cytoplasmaet til bakteriene.
• Fiolett fjernes deretter med en 90 ° løsning av etanol . Dette trinnet er avgjørende fordi det gjør det mulig å skille Gram-negative bakterier fra Gram-positive bakterier . Prinsippet er som følger: Gramnegative bakterier har en vegg som er dårlig i peptidoglykan , en komponent som på grunn av den lille mengden gjør at alkoholen kan vaske bort gentianfioletten, som forsvinner fra cytoplasmaet. Bakteriene misfarges derfor (for mer informasjon, se egenskapene til gramnegative bakterier ).

• Etter skylling senkes lysbildet kort ned i et andre fargestoff, fuchsin (1 minutt). Dette fargestoffet krysser alle vegger og membraner og fargelegger rosa alle bakteriene som ble misfarget i løpet av forrige trinn. bakterier gram positive som er farget i lilla (mørkere) vil ikke virke rosa (lysere).

Lysbildet blir deretter gjenvunnet, skyllet og tørket, deretter observert under et optisk mikroskop, vanligvis med en x100 objektiv + nedsenkningsolje. Bakterier gramnegativ vises i rosa. Observasjonen av fargen ledsages vanligvis av strukturelle beskrivelser (f.eks. Basiller eller skall ).

Kjennetegn på gramnegative bakterier

Gramnegative bakterier har (med noen unntak) en bimembranstruktur som er organisert i tre store deler, nemlig fra utsiden til innsiden:

• Den ytre membranen,
• Det periplasmatiske rommet, som særlig består av veggen ,
• Plasmamembranen.

Den ytre membranen er i direkte kontakt med det ytre miljøet. Den består hovedsakelig av fosfolipider organisert i et dobbeltlag ( hydrofil del på utsiden og lipofil del på innsiden), men inneholder også mange indre proteiner , spesielt transportproteiner som kalles poriner . Mange gramnegative bakterier (f.eks. Salmonella ) har også en ikke-proteinforbindelse kalt lipopolysakkarid eller LPS; denne dårlig immunogene forbindelsen , hvis patogenisitet (lipid A) er inkludert i den ytre membranen, aktiveres under lysering av bakteriene. Den ytre membranen er koblet til peptidoglykanen gjennom Brauns lipoprotein .

Det periplasmiske rommet er en lagringsplass for enzymer , næringsstoffer osv. Det har mange andre funksjoner, spesielt i visse stadier av proteinbiosyntese og metabolisme . Den er plassert mellom den ytre membranen og plasmamembranen, og den inneholder et lag av peptidoglykaner. Laget av peptidoglykan (også kalt murein) er relativt tynt i gramnegativt i motsetning til grampositivt .

Plasmamembranen er lik den ytre membranen (unntatt LPS). Den har porøse proteiner som ender i det periplasmatiske rommet (proteinbiosyntese). Plasmamembranen inneholder mange andre proteinkomplekser av avgjørende betydning for bakteriene (som ATP- syntase ) som har store roller i bakteriell metabolisme.

Eksempler

• Familie Alcaligenaceae
  • Slekt Bordetella eksempel: Bordetella pertussis
• Familie av Enterobacteriaceae  :
  • Slekt Salmonella
  • Slekt Escherichia eksempel: Escherichia coli
  • Slekt Yersinia eksempel: Yersinia pestis (ansvarlig for pest )
• Familie Vibrionaceae  :
  • Slekt Vibrio eksempel: Vibrio cholerae (ansvarlig for kolera )
• Familie Pseudomonadaceae  :
  • Slekten Pseudomonas
• Familie Rhizobiaceae
  • Slekt Agrobacterium eksempel: Agrobacterium tumefaciens (ansvarlig for krongalle )
  • Slekt Rhizobium eksempel: Rhizobium rhizogenes

Imidlertid bør det bemerkes at selve faktumet med å gruppere bakterier i disse familiene blir satt i tvil, med unntak av familien Enterobacteriaceae som alene har en genetisk likhet med hverandre og ikke bare biokjemisk.

Se også

• Negibakterier
• Grampositiv
• Den mykobakterier  : et unntak fordi ikke stainable ved Gram metode, er syrebestandig.

Se Ziehl-Neelsen-farging .